优化 DDA 高分辨数据在 MetaSense 中的处理效率
针对 MetaSense 用户反馈的"DDA 模式采集数据运行时间长、效率低"问题,本文以 AB SCIEX Triple TOF 5600 代谢数据为例,介绍如何通过合理设定软件参数来缩短处理时间。文中案例采用数据依赖型采集(DDA)模式,其他采用 DDA 采集的仪器也可参考本指南。
01 导入与基础设定
打开 MetaSense 主程序界面,设定好样品名和数据,建议先将数据在 Processor 中转成 .spectrus 格式,这样可以减少软件运行时间。设定好 Parent 的保留时间,以及数据分析保留时间区间(注意设定格式,本例设定为 8..25)。Triple TOF 的 MS Accuracy 推荐设定为 0.005 Da。
02 指定采集模式与代谢物列表
点击 Next 进入下一步。通常软件会自动识别仪器种类与采集模式(Instrument Type / Acquisition Type);若不能正确识别,需在 Acquisition Type 下拉菜单中人工指定为 DDA。外部代谢物列表(External Metabolite List)选择默认的 Percepta 列表,点击对应 option 可设定代谢类型。
03 组分识别算法:ItelliTarget
在 Component Detection Algorithm(组分识别算法)中选择 ItelliTarget。点击其后的 option 进入参数设定:
- 将 Data Analysis Region 中的 Full 改为 false,并在 Start tR 与 End tR 中设定对应的数据分析区间(本例分别为 8 和 25);
- 在 Peak Picking 栏设定组分的标峰参数,主要可调整 Peak Minimum Height(最小峰高)、Peak S/N Threshold(峰信噪比)与 Peak Area Threshold(最小峰面积阈值)。这三个参数应根据自己数据的实际情况调节——本例将最小峰高阈值设定为最大峰高的 0.1%;
- Smoothing 栏无需调整,不进行平滑处理;
- 在 Target Analysis 栏设定提取组分 MS 谱图的 MS 精度(Mass Accuracy for MC Generation):高分辨质谱可设定为 0.005 Da;组分分子式吻合度指数 FFQ(Formula Fit Quality Index)设定为 0.5——该指标是所选组分的计算同位素模式与实验同位素模式的"相似性度量",完全吻合为 1,最不吻合为 0,通常可设定中间值 0.5。
04 高级参数
勾选窗口右侧 Advanced 进入高级参数设定窗口,此处仅需设定一个参数:找到 Mass Accuracy for Peak Labeling,将 Mass Accuracy 设定为 0.005 Da(该参数设定的是 MS 谱图中数值的显示精度)。
05 代谢物确认(Metabolite Confirmation)
勾选主界面右下角 Use Advanced Setting 进入高级参数设定。在 Metabolite Confirmation 栏中,需针对不同的实验类型做相应调整:
- 单点数据:请将 Remove Metabolite With Maximum in T0、Remove Metabolite with Only One Peak、Remove Metabolite with Slow Speed Reaction 与 Remove Metabolite with Significant Fluctuation 调整为 False;
- 多点数据(如孵化实验):可将上述四个参数调整为 True。
本例为单点实验,故四个参数均为 False。
06 运行
点击 OK 回到主界面,参数设定完成,点击 Run 即可运行。
| 参数 | 建议值 / 说明 |
|---|---|
| MS Accuracy(Triple TOF) | 0.005 Da |
| 数据分析区间 | Start tR / End tR 设为实际区间(本例 8 / 25) |
| 组分识别算法 | ItelliTarget |
| 最小峰高阈值 | 最大峰高的 0.1%(按数据实际调整) |
| Mass Accuracy for MC Generation | 0.005 Da(高分辨) |
| FFQ | 0.5 |
| Mass Accuracy for Peak Labeling | 0.005 Da |
| Metabolite Confirmation(单点) | 四个 Remove 参数均设为 False |
通过预先转存 .spectrus 格式、限定数据分析区间、合理设定标峰阈值与质量精度,可显著缩短 DDA 高分辨数据的处理时间,提升 MetaSense 的代谢物鉴定通量。
如需进一步了解产品详情、预约演示或获取方案与报价,欢迎通过联系我们与我们沟通;产品功能总览可参阅MetaSense 产品页,代谢物鉴定工作流原理可参阅《从预测到鉴定:MetaSense 代谢物鉴定工作流解析》。
本文整理自凯美科公众号文章,配图取自原文。原文中的二维码、联系方式与推广信息已按站内统一规范移除。
